МЕТОД МОЛЕКУЛЯРНОГО КЛОНУВАННЯ (ID:351888)

ВСТУП Клонування – отримання нащадків, що є точною генетичною копією організму. Сукупність таких нащадків-копій, що походять від одного організму, називають клоном [9]. Організми в межах кожного клону характеризуються однаковою фенотипической однорідністю та ідентичним генотипом. Термін "клон" був вперше використаний в 1903 році Веббером (Webber, Німеччина) стосовно до рослин, розмножується вегетативно, і означав, що дочірні рослини клону генетично ідентичні материнському. В даний час розробки в області генної інженерії дозволяють клонувати не тільки мікроорганізми і рослини, а й тварин. Вперше трансплантацію ядер соматичних клітин зародків у енуклейовані клітини жаби здійснили американські дослідники Р. Бріггс і Т. Кінг у 1952 році. Вчені, користуючись мікропіпеткою, видаляли ядра з яйцеклітин шпорцевої жаби, а замість них пересаджували ядра клітин ембріонів, що знаходяться на різних стадіях розвитку. Проведені дослідження показали, що ядра ранніх ембріонів у стадії пізньої бластули і навіть ранньої гаструли володіють тотіпотентність і забезпечують нормальний розвиток ембріонів. Якщо брати ядра з клітин зародка на ранній стадії його розвитку - бластули, то приблизно в 80% випадків зародок благополучно розвивається далі і перетворюється на нормального пуголовка. Якщо ж розвиток зародка, донора ядра, просунулося на наступну стадію - гаструли, то лише менш ніж у 20% випадків оперовані яйцеклітини розвивалися нормально. При пересадці ядер з більш диференційованих клітин (мезодерми і середньої кишки) пізньої гаструли у ембріонів спостерігалося недорозвинення і навіть відсутність нервової системи. Після пересадки ядра з клітин більш пізнього розвитку яйцеклітини взагалі не розвивалися [7]. Клонування — процес отримання генетично ідентичних нащадків методом нестатевого розмноження. Клоном у біології називають групу генетично ідентичних організмів, що походять від спільного попередника. Так, наприклад, вірусний клон — це популяція вірусних часток, що утворюються внаслідок багаторазового подвоєння (реплікації) ДНК одного віріона [1]. Клітинний клон — це популяція клітин, отримана від однієї клітини шляхом її багаторазових поділів. Всі члени клону, як правило, генетично ідентичні один одному, а також тій батьківській формі, яка дала початок клону. Клони бактеріальних, а в останній час також рослинних і тваринних клітин отримують шляхом розрідженого висіву клітин-попередників на чашки Петрі [2].   1. Історія досліджень з клонування тварин Можливість клонування тварин довів Дж. Гердон, англійський біолог, який першим зумів отримати клоновані ембріони шпорцевих жаб. Він випалював ультрафіолетом ядра ікринок і потім підсаджував в них ядра, виділені з клітин епітелію пуголовків цього виду. Більша частина отриманих таким чином ікринок гинула, і лише зовсім маленька їх частка (2,5%) розвивалася в пуголовків. Дорослих жаб отримати таким чином не вдавалося. Тим не менше це був успіх, і результати дослідів Гердона розповсюджені по підручники і посібники з біології. У 1976 р. Гердон і його співавтор Р. Ласки публікують роботу, в якій описують досліди з ядрами, виділеними з клітин нирок, шкіри і легкого вже дорослих шпорцевих жаб. Дослідники спочатку підрощувати ці клітини поза організмом (in vitro), а потім вводять їх ядра в без'ядерні ікринки. Чверть таких ікринок починає ділитися, але незабаром завмирає на одою з стадій розвитку. Тоді вчені виділяють ядра отриманих ембріонів і знову підсаджують їх в позбавлені власних ядер ікринки. У результаті цілої серії подібних пересадок на світ нарешті з'являється кілька пуголовків. ..... ......